喷射冷冻联合平阳霉素注射对兔面神经的影响
- 作者:admin 来源:网络 日期:2009-3-4 23:56:40
- 【摘要】目的观察喷射冷冻联合平阳霉素注射作用于兔面神经颊支后导致的神经结构和传导功能的改变，探讨此法用于临床治疗老年人颌面部静脉畸形时能否导致面瘫。方法于一侧兔面神经颊支神经外膜下注射2mg/ml平阳霉素200μl后，对兔面神经颊支行喷射冷冻15～20s，另一侧作为正常对照。采用光学显微镜、透射电镜及神经电生理学检测观察在处置后1、3、7、14、28、56d兔面神经颊支形态学和传导功能的变化。结果白兔均出现不同程度的面神经变性和神经传导速度减慢，但这些改变在处置后56d均恢复正常。结论喷射冷冻和平阳霉素注射所导致面神经出现变性及神经传导速度减慢均为可逆性改变，在56d后可以恢复正常。
【关键词】平阳霉素；冷冻；面神经
当静脉畸形位于老年人面侧腮腺周围时，局部进行冷冻与平阳霉素注射能否引起面神经的传导功能改变从而导致面瘫尚未见报道。本实验利用光学显微镜、电镜和神经肌电图仪观察喷射冷冻联合平阳霉素注射作用于兔面神经颊支后所导致的面神经结构和功能改变，探讨将喷射冷冻联合平阳霉素注射方法用于临床治疗老年人面颊腮腺区静脉畸形的可行性。http://www.dxlww.net代写论文网
1材料与方法
1.1实验动物选用10只健康日本大耳白兔，雌雄不限，体重每只1.5～2.5kg。由湖北省医学实验中心提供。从湖北省医学科学院购买全营养颗粒饲料进行饲养。
1.2实验方法肌肉注射速眠新0.2～0.4ml（0.2ml/kg）麻醉后施术，以侧卧位固定于操作台上。术野脱毛，碘酒、酒精消毒，铺巾。取耳前颌下切口，从腮腺嚼肌筋膜的浅面将皮瓣往前翻起，显露面神经颊支。用微量注射器向面神经颊支外膜下注入200μl(浓度2mg/ml)药液，注射点旁用丝线标记; 在保护好周围组织后直视下液氮喷射冷冻15～20s。处置完毕后关闭伤口。另一侧作为正常对照。术后动物分笼饲养,青霉素80万单位肌注3d。
1.3标本制作及观察进行石蜡标本制作和常规HE染色；采用Bielschowsky改良法。
1.3.1透射电镜观察分别于处置后1、3、7、14、28、56d切取处置段1mm3的兔面神经颊支标本置于4℃、2.5%戊二醛中固定24h，经缓冲液冲洗后用1%四氧化锇固定1～2h，梯度脱水，渗透，树脂包埋，超薄切片，透射电镜下观察。
1.3.2神经的电生理学检查术后1、3、7、14、28、56d分别进行面神经的电生理学检测，具体方法如下：在室温25℃，恒温台维持动物肛温38℃～39℃条件下，采用日本KOHDEN公司MEM3202型肌电图仪，全麻下记录各处置组处置前，处置后1、3、7、14、28、56d兔面神经颊支诱发电位。刺激电极置于颊支近中端，记录电极插入口角处之口轮匝肌，经XY记录仪记录图形，得到潜伏期及动作电位波幅并计算神经肌肉传导速度（刺激电极至记录电极之距离／潜伏期）。参数设置：刺激信号为波宽0.1ms单向方波电脉冲，刺激强度5mA，刺激频率1次／s，刺激电极和记录电极均为双极氯化银针电极，极间距2mm。
1.4统计学方法采用方差分析进行统计学处理。
2结果
2.1肉眼观察所有白兔伤口愈合良好，胡须两侧对称。切取标本时沿原切口切开，各处置组颊部皮肤、皮下及浅筋膜界限不清，相互黏连,面神经颊支失去原有的光泽，周围包绕纤维结缔组织。
2.2组织学观察
2.2.1家兔正常面神经神经外膜连续圆滑，神经束完整，束膜连续圆滑，束内神经原纤维与束膜贴合紧密。纵断面见束内神经原纤维平行排列且排列紧密，密度均匀，边缘规整，神经束膜薄而致密；横断面可见神经原纤维呈圆形或椭圆形，结缔组织较少，髓鞘密度均匀(图1A)。
2.2.2冷冻联合平阳霉素注射处理后第1天，神经结构基本正常，部分髓鞘出现脱髓鞘样变(图1B);第3、7、14天，可见神经束内轴突发生空泡样变，神经纤维溃变明显(图1C)；第28天可见变性的神经与正常神经结构共存(图1D)；第56天神经结构基本正常。
2.3透射电镜观察
2.3.1家兔正常面神经神经纤维的髓鞘呈板层状排列,包裹中央的轴索，轴索内微丝排列规则均匀。雪旺氏细胞胞体多呈椭圆形，核膜完整，细胞质内见线粒体、粗面内质网、小泡等(图2A)。
2.3.2喷射冷冻联合平阳霉素注射处理后第1天可见神经大体正常，部分髓鞘出现脱髓鞘样变(图2B)；第3、7、14天，髓鞘排列严重紊乱，空泡样改变明显(图2C)；第28天，可见神经破坏新生共存，以破坏为主：变性的神经纤维之间可见许多再生轴索，雪旺氏细胞增生(图2D)；56d时雪旺氏细胞及神经结构均正常(图2E)。图1家兔面神经组织学观察结果(HE，×40)
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