Hendra病毒的研究进展
- 作者:admin 来源:互联网 日期:2009-12-31 17:02:56
- 过其他试验所得到的阳性或可疑结果,均需要通过血清中和试验进行验证。Cra-meri等〔18〕建立了一种快速检测HeV和NiV及其抗体的方法,将HeV和NiV接种Vero细胞,细胞发生病变后将细胞固定,用基因工程制备的P蛋白作为抗原免疫兔制备高免血清,用间接荧光抗体实验病毒P蛋白抗原。
5.3 酶联免疫吸附检测(Enzyme-linked immu-nosorbent assays,ELISA) ELISA具有敏感、快速和高通量的特点,非常适合作为流行病学调查和血清学筛查工具。在HeV的流行病学调查中,该方法也发挥了很大的作用。最早的ELISA方法是用于检测感染HeV马的血清中IgG抗体,美国CDC则使用捕获ELISA来检测血清中的IgM抗体〔17〕。尽管ELISA方法特异性较高,但其判定条件需要仔细评估,对阳性样本需用SNT进行验证,只有在两个体系中均反应的样本才被认为是阳性。5.4 PCR检测 PCR检测应用方便,结果直观,具有快速、准确的特点,已广泛用于病毒检测。HeV检测还需与NiV的鉴别。两者的鉴别有两种方法,一种是澳大利亚的RT-PCR,采用巢式引物扩增病毒M基因;另一种是美国CDC的PCR法,扩增N基因〔17〕。目前国内外已经建立了HeV的RT-PCR检测方法,例如Smith等〔19〕建立了一步法实时RT-PCR检测方法,可以收到样本后在4h内做出诊断,并有很高的敏感性,与常规nested RT-PCR相比,由于不需第二次扩增和扩增后电泳操作,减少了假阳性结果,可作为HeV的快速诊断方法。
5.5 免疫组织化学(Immunohistochemistry, IHC) IHC在澳大利亚HeV感染的诊断中发挥了重要作用。通过福尔马林固定组织,可以对以前采集的组织材料进行回顾性调查〔20〕。此外,单克隆抗体(monoclonal antibody,MCA)也被用于对病原及其特异性抗体的免疫学鉴定,目前已经有关于针对HeV的MCA制备及其在诊断实验中应用的报道。Xiao等〔21〕使用HeV重组核蛋白,免疫BALB/c鼠制作了2株单克隆抗体,通过免疫组织化学方法可以特异性结合实验感染的马肺组织切片上的HeV抗原,可用于HeV感染的诊断。
6 诊断与治疗
虽然目前没有新发病例,但如果患者有流感样症状,出现肺炎或脑炎,并有与果蝠或病马的接触史时,应高度怀疑HeV感染。
临床治疗主要以支持治疗为主,在病毒感染早期使用利巴韦林可能有一定作用,实验证实利巴韦林在体外能够抑制HeVRNA转录,减少病毒粒生成〔22〕,提示可以使用利巴韦林治疗HeV感染,但其临床疗效尚无法评估。此外,研究还发现m101-107人单克隆抗体可以特异性结合HeV的G蛋白,具有明显的中和病毒活性,可以用于治疗和预防等〔23-24〕。
7 预 防
避免与已经明确感染此病毒的动物接触,可有效防止该病的发生。必须与可疑感染的动物接触时,要使用适当的个人防护设施。人类感染这种疾病必须有动物宿主做媒介才能够发生,因此早期发现此种疾病的宿主动物,对于控制人类感染是至关重要的。
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