急性胰腺炎实验动物模型的研究进展
- 作者:admin 来源:互联网 日期:2010-1-20 2:06:55
- 杂，容易造成肠梗阻，甚至肠管缺血性坏死，且胰腺坏死可逆性差，动物死亡率高。
2.胆胰管注射法
Aho[23]首次采用切开大鼠十二指肠前壁，再经十二指肠乳头插入塑料管，向胰胆管内逆行注射5%牛黄胆酸钠（sodi－um taurocholate,ST），成功诱发大鼠SAP模型。但该法制备过程中需切开十二指肠外侧壁，并用注射针穿刺经过十二指肠内侧壁至胆胰管后进行模型诱导。操作过程中易引起十二指肠血管损伤引起大出血。模型诱导后胆胰管内牛磺胆酸钠易经胆胰管开口和穿刺“假道”溢出而影响模型制作成功。现在常用十二指肠直接穿刺法[24]，提高了实验成功率，降低了实验动物死亡率。后来该法再度改良，应用微量泵胰胆管内注射药物，较好地控制了药物注射速度。近年Goldenberg等[25]用切开小肠逆行注射5%牛黄胆酸钠1 ml/kg的方法成功在兔子身上建立AP模型。Zhang等[26]用0.1 ml/100 g 3.5%牛黄胆酸钠逆行注射胆胰管也成功建立小鼠SAP模型，该模型适用于研究SAP多器官损伤。
目前该法被广泛应用于研究临床胆汁返流性胰腺炎的病因发病机制及药物治疗疗效的判断。SAP中高死亡率与胰腺和胰周组织二次感染密切相关。研究表明集落刺激因子（G-CSF）能增加粒细胞数量并增加其功能。然而，粒细胞的增多也可以使炎症反应增强。为了探讨G-CSF在SAP早期阶段中的作用，Tuo等[27]用逆行注射3%ST 0.2 ml建立SAP模型，1 h后给与G-CSF，结果显示血浆和腹水里吞噬细胞和中性粒细胞明显增多，但血浆和腹水里IL-6、IL-1、TNF-α等细胞因子无明显增加。提示在SAP早期，G-CSF能增加粒细胞数量并增强其活性，但是不会加强腹内和全身系统的炎症反应。如前所述，AP早期产生大量的氧自由基，所以对氧自由基的清除有可能减低AP中的器官损伤。He等[28]用5%ST逆行注射建立小鼠ANP模型，然后在从胰管逆行注射康德灵，从而观察该药对AP的作用。结果显示该药作为一种氧自由基清除剂能明显减轻胰腺细胞的损伤，对其进一步研究，有助于我们了解AP发生机制以及发现AP治疗方法的新思路。Schwarz等[29]也应用该法建立小鼠ANP模型，用于比较抗生素在AP早期（诱导后2、12、20、28 h）使用与晚期（诱导后16、24 h）使用疗效。发现两种治疗方案都能明显减轻胰腺感染达58%到8%～25%。但胰外器官感染的减少只出现在早期抗生素应用组。对临床ANP治疗中抗生素的使用时间有一定的指导作用。Nikfarjam等[30]对ST-AP小鼠模型进行高压氧治疗，结果显示高压氧治疗组与对照组比较，胰腺坏死明显降低，肺水肿程度无明显差别，生存中值和7 d生存率明显提高。表明高压氧治疗可以降低AP总体严重程度，减少胰腺坏死，并可以提高生存率。
该法优点是诱发成功率高，有很好的重复性和可比性。所诱导的大鼠急性出血性胰腺炎模型在病因、致病机制、病理方面与临床急性出血坏死型胰腺炎相似。缺点是操作费时，实验动物存活期短、易造成胆漏。3.联合应用Kerem等[31]用CAE和L-Arg分别建立AEP和ANP小鼠模型，用于研究不同严重程度AP中Ghrelin和Leptin两种激素的变化。Ghrelin是一种有28个氨基酸的多肽，存在于胃黏膜内分泌细胞和胰腺ε小岛细胞中。Leptin是由肥胖基因编码的一种16-kDa蛋白，主要存在于下丘脑，也存在于胃、肝、胰腺等组织中。它们都能影响胰腺的内外分泌功能和调控摄食行为与能量代谢。结果显示在AP诱导后48 h，Ghrelin和Leptin均升高，并与AP严重程度成正相关。推测它们在AP中的作用是使血糖升高和减轻炎症细胞的浸润。对Ghrelin和Leptin的检测有助于判断AP的严重程度，还可以应用于AP的晚期诊断。
Segersvard等[32]为研究解耦联蛋白2（UCP2）在AP中的作用，用CAE-AP模型研究其在不同时间点AP中的变化，用ST-AP模型研究其在不同严重程度AP中的变化。结果显示UCP2 mRNA于CAE-AP诱导后12 h无明显变化，但于24 h表达明显增多，为正常对照组的12倍。在ST-AP模型中，AP严重组UCP2 mRNA表达量为正常对照组4倍。UCP2表达量与胰腺损伤程度相关连。由此推断UCP2的上调是氧化应激的保护因素，然而其不利的方面是影响了细胞能量代谢，造成细胞损伤。UCP2基因在调节AP严重程度中起重要作用。
联合应用能弥补不同模型方法的缺点，更好地模拟人体AP的发生发展过程，值得进一步推广和应用。
三、其他
此外，尚有动脉注射微球法、感染柯萨奇病毒法、高钙血症法、胰腺直接损伤法、免疫法、缺血再灌注法，均能成功诱导AP的发生，对研究AP的病因发病机制以及治疗方法也发挥了重要作用。
四、结语
本文介绍了几种目前比较常用的几种制作急性胰腺炎动物模型方法及各自在AP研究方面的应用，每种方法各有优缺点，目前尽管还没有一种动物模型能完全解释急性胰腺炎的病因发病机制，但是根据实验目的选择相应的模型，对研究急性胰腺炎的发生发展具有重要意义。
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